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国内独家丨环特为科研机构提供300余个斑马鱼品系(具备生产许可证)

发布时间:2024-01-17

近年来,斑马鱼作为美国国家卫生研究院NIH确定的继大鼠和小鼠之后的第三大脊椎模式动物,其与人类基因同源性高达87%,在发育生物学、基因组学、疾病机制研究、环境科学、化妆品、功能食品、药物研发及功效与安全性评价等领域应用广泛。随着斑马鱼研究的深入与迅速发展,中国已成为仅次于美国的第二大斑马鱼研究大国,斑马鱼基因编辑品系的开发速度越来越快,对不同斑马鱼品系的需求也越来越多。

然而,不同的斑马鱼品系适合于不同的研究需求,为了方便科研人员更精准地选择合适的斑马鱼品系,更合理地应用不同品系的斑马鱼开展差异化研究,环特生物作为拥有斑马鱼实验动物生产、使用许可证的企业,特备“年终斑马鱼大放送”活动,为科研机构提供300余种斑马鱼品系,现火热启幕——

01、野生型斑马鱼品系

目前,常见的斑马鱼品系可分为野生型、转基因型、突变型三大类,据统计,已开发的斑马鱼突变品系已多达3000多种,转基因品系及其它基因编辑品系也有数千种,庞大的斑马鱼品系资源持续推动着斑马鱼科学研究的发展。

其中,被定义为野生型斑马鱼品系超过30种,但最常用的斑马鱼野生型品系主要包括AB品系、Tuebingen品系(Tu品系)、WIK品系等。作为健康美丽产业CRO服务开拓者与引领者、斑马鱼生物技术应用的全球领导者,环特生物引进了高质量、品系丰富的野生型斑马鱼品系,如AB品系、Tu品系等,并拥有实验动物生产和使用双许可证,自有8000+m²斑马鱼实验室,已通过CNAS、CMA、AAALAC认证,持续为科学研究人员提供多种野生型斑马鱼品系销售服务。

AB品系

AB品系,源于美国俄勒冈大学实验室,是最早被采集和研究的斑马鱼野生品系,也是实验室最常用的斑马鱼品系。其具有经典的蓝色底色和黑色纵向条纹,最初是由当地的宠物商店购入,经过数代筛选去除胚胎早期死亡或畸形的突变,并由单倍体细胞经早期加压法获得。

Tu品系

Tu品系斑马鱼,源于德国Tübingen马普研究所实验室,是英国Sanger中心进行斑马鱼基因组测序时最初使用的野生型品系,其与AB品系外观近似,都是短鳍正常条纹外观品系,但体型稍大,通常体长在3-4厘米之间。Tu品系斑马鱼具有较高的免疫力和抗病性,因此利用它进行疾病模型研究时更为可靠和稳定;它在用于制备突变体和基因组测序前去除了胚胎致死相关的突变基因。目前,斑马鱼基因组测序计划所用品系是Tu品系。

WIK品系

WIK品系与Tu品系有亲缘关系,是一种具有白色底色和黑色纵向条纹的斑马鱼品系,在实验室中被广泛用于研究颜色和纹理发育。相较于Tu品系,其具有更多的形态多样性。

其他野生型品系

除此之外,其他的常用野生型品系还包括SAT(Sanger AB Tü,由Sanger中心产生的AB和Tü杂交后代),TL(Tupfel long fin,携带leot1和lofdt2的双突变纯合子,为长鳍斑点外观品系),以及Ekkwill(EK)、Nacre(NA)、Riken(RIK)等,每种品系都有其特定的特征和适用于研究的优势。

02、基因编辑品系斑马鱼

利用高效的转座子系统,可以实现稳定遗传的转基因斑马鱼品系构建,通过高效、快速筛选出转基因的P0代斑马鱼,进而培育出F1、F2代转基因斑马鱼,从而有效克服外源基因在后代传递频率低的技术难题,大大提高转基因鱼中的外源基因表达效率,被广泛应用于遗传学、发育生物学、细胞生物学、医学、环境毒理学、水产育种学等研究领域。

目前,环特生物依托于10多年的基因编辑技术服务经验,为客户构建了300多个基因编辑斑马鱼品系,涵盖心脏、血管、肝脏、肾脏、神经、免疫等特定器官或组织表达荧光的转基因斑马鱼,测试超过2000个gRNA靶点,服务基因编辑客户数量超过200家,让科研实验事半功倍。部分代表性基因编辑斑马鱼品系如下——

Ki(th-EGFP)品系

该品系通过在th(酪氨酸羟化酶)基因的3’端敲入EGFP的方法构建敲入品系,可以很好地标记单胺能(包括多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素)神经元,被广泛用于该类神经元相关的形态和功能研究。如下图为3dpf的斑马鱼幼鱼脑部成像:

Tg(cmlc2:mRFP-EGFP-LC3)品系

该品系利用心肌细胞特异表达的启动子在斑马鱼心肌细胞中表达mRFP、EGFP和LC3( map1lc3b )的融合蛋白用于指示心肌细胞中的自噬小体(EGFP阳性和mRFP阳性)和自噬溶酶体(EGFP阴性和mRFP阳性,因EGFP对酸性敏感导致其在自噬溶酶体中荧光强度降低),可广泛用于心肌自噬相关的研究和药物测试。如下图为2-5 dpf的斑马鱼心脏单层成像:

Tg(lyve1b:DsRed2)品系

该品系利用淋巴管(lymphatic vessels)特异表达基因lyve1b的启动子驱动DsRed2表达,可特异标记斑马鱼头部、肠道和躯干浅表区域中的淋巴管,可用于研究淋巴发育、形态和功能研究。如下图为5 dpf的斑马鱼淋巴管部分成像:

Tg(itga2b:EGFP)品系

该品系利用整合素α2b(itga2b,CD41)的启动子驱动EGFP在造血干祖细胞(Hematopoietic stem and progenitor cells,HSPCs)和血小板中特异表达构建的转基因品系。itga2b参与血管发生、凝血和内皮细胞增殖。可用于与Glanzmann血栓形成症、血小板相关出血性疾病、血小板减少症等相关研究。如下图为3dpf的斑马鱼全身成像:

Tg(elavl3:tdTomato)品系

该品系使用神经元发育标记基因elavl3(基因别名huc)的启动子在斑马鱼神经元细胞中特异性表达荧光蛋白tdTomato,可用于神经发育相关的研究和药物测试。如下图为3dpf的斑马鱼头部和躯干部分成像:

线粒体荧光标记转基因斑马鱼品系

环特生物独家自研线粒体荧光标记转基因斑马鱼,诱导建立线粒体损伤模型,通过对比斑马鱼身体肌肉线粒体荧光强度,评价样品是否具有增强线粒体功效。该方法可适用于化妆品及其原料的增强线粒体功效评价。下图为增强线粒体典型图(黄色虚线部位为定量区域)

目前,环特生物提供各类基因编辑斑马鱼品系构建服务,也可根据委托方的需求,因需定制,通过显微注射、CRISPR/Cas9介导、Tol2转座子介导等方法,将外源基因随机或定点整合到斑马鱼基因组中,用于标记特定器官和细胞、指示特定基因的表达模式、调节特定基因的表达及功能水平等,助力各种疾病及前沿科学研究。

03、突变型斑马鱼品系

近年来,由于斑马鱼生长发育过程、组织系统结构与人有很高的相似性,斑马鱼成为研究人类疾病、化妆品及功能性食品等的优良模式生物。越来越多的科学研究人员利用斑马鱼突变品系,通过化学诱导法、射线照射法、插入突变等来模拟人类疾病。如,sau突变体类似于人ALAS-2基因突变引起的先天性铁粒幼红细胞性贫血症,yqu突变体与人的红细胞卟啉症类似,gridlock突变体类似于人类的先天性动脉血管收缩症等。

目前,环特生物已自主构建了黑色素等位基因突变斑马鱼(Albino)、突变斑马鱼品系gridlock (gdl)等突变品系,为化妆品原料筛选、配方研发及类雌激素等定量检测提供一种全新的方法,加速疾病模型构建、化妆品功效与安全性评价及前沿科学研究。

黑色素等位基因突变斑马鱼(Albino)

该品系slc45a2b4基因参与色素形成过程,提取其中的酪氨酸酶和黑色素蛋白,进行OD值测定,通过皮肤黑色素信号强度、酪氨酸酶活性和黑色素蛋白的含量,可以反映供试品的美白功效。下图为利用黑色素等位基因突变斑马鱼(Albino)品系呈现的斑马鱼头部黑色素表型图:

心血管系统模型

斑马鱼突变品系可作为研究心脏节律、心脏管形成、瓣膜发生和心脏环化的模型。以突变斑马鱼品系gridlock (gdl)为例,其可用于研究人类主动脉缩狭疾病。突变斑马鱼gridlock发生主动脉发育不正常,造成血液阻塞无法流至躯千及尾部,也因此在阻塞区域常发育出额外平行的动脉。籍由研究gridlock研究发现,在早期动、静脉细胞分化过程中,本该发育为动脉的细胞转发育成静脉。

近年来,随着斑马鱼品系的不断拓展,斑马鱼技术为揭示各类疾病机制、精准医疗的发展奠定了基础,并为解锁药物研发、化妆品及功能性食品功效与安全性评价等的奥秘提供了独特的视角。

环特生物构建了丰富的斑马鱼品系,具备以多种基因编辑技术为核心的强大模型开发能力,并领先业界开创性地建立了以斑马鱼、类器官、哺乳动物、人体临床为特色的“四位一体”综合型技术服务平台,致力于为客户提供高质量的斑马鱼品系,助力健康美丽事业及科学研究,开创斑马鱼技术应用新时代!

现环特生物特备“年终斑马鱼大放送”活动,为科研机构提供300余种斑马鱼稳定品系!火热进行中~~~

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