环特生物_斑马鱼实验模型
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斑马鱼实验模型

利用斑马鱼模型评价促进排铅功效

【评价原理】

铅中毒的器官主要是造血系统、心脏和神经系统。对于儿童的神经系统损伤导致智商降低,注意力缺陷多动障碍以及阅读和学习能力下降,其毒性机制与神经元生长和轴索束变化相关。

通过斑马鱼体内铅含量、轴索荧光强度和运动神经长度检测,铅中毒的斑马鱼体内铅含量明显比正常斑马鱼的高很多,而轴索荧光强度和运动神经长度铅中毒斑马鱼均明显少于正常斑马鱼。由于斑马鱼可被整体免疫荧光染色以及转基因荧光鱼运动神经发荧光的特性,我们可以通过荧光强度观察到明显的轴索细胞和运动神经的变化。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成五组,分别是正常对照组、模型对照组和服用促排铅剂组。其中正常对照组未摄入铅,模型对照组与服用促排铅剂组都摄入了等量的铅(铅通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用促排铅剂组在摄入铅的同时摄入绿豆肽复方之类的促排铅剂。

服用一段时间促排铅剂后,我们(1)检测体内铅含量;(2)用荧光显微镜采集轴索荧光强度;(3)用荧光显微镜采集运动神经长度。

【结果展示】

(1)体内铅含量:

斑马鱼体内铅含量

图1. 斑马鱼体内铅含量

与模型对照组比较,*p < 0.05

可以看到,服用排铅剂组的铅含量与摄入相同铅的模型对照组比较相似明显减少。

(2)轴索荧光强度:

斑马鱼脑部轴索束表型

图2. 斑马鱼脑部轴索束表型

黄色虚线区域红色荧光标记代表脑部的轴索束

可以看到,服用排铅剂组脑部轴索荧光强度与摄入相同铅的模型对照组比较明显增加。

(3)运动神经长度:

周围运动神经表型

图3. 周围运动神经表型

红色虚线代表运动神经长度

可以看到,服用促排铅剂组的运动神经长度与摄入相同铅的模型对照组比较明显变长。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用促排铅剂组的铅含量、轴索荧光强度和运动神经长度与未摄入铅的正常对照组相似,并未出现模型对照组的铅含量升高,轴索荧光强度和运动神经长度减少的情况。

2.本实验证实了绿豆多肽复方具有明显的促排铅功效。