环特生物斑马鱼和大小鼠实验中心
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斑马鱼与大小鼠模型实验中心

利用斑马鱼评价化妆品祛痘作用

【评价原理】

痤疮是皮肤无法正常排泄油脂而引发的一连串炎症反应,是毛囊皮脂腺组织部位发生的慢性炎症性皮肤症状,主要发生部位为脸部和胸背部等皮脂分泌旺盛区域。痤疮的临床表现不一,包括轻微粉刺,丘疹,结节,囊肿甚至瘢痕等。目前痤疮发病机理并没有被完全研究透彻,但公认有以下4种原因:1)雄激素对皮脂腺调控异常;2)皮脂腺导管角质化异常;3)痤疮丙酸杆菌过度繁殖;4)炎症免疫反应。痤疮丙酸杆菌与痤疮的发生密切相关,它在促进炎症介质的释放方面发挥特定的作用。痤疮丙酸杆菌通过刺激单核细胞及皮脂细胞中关键的炎症小体基因NLRP3和IL-1β来触发先天免疫,此外,它激活toll样受体(TLRs)和蛋白酶激活受体,并通过角质形成细胞刺激干扰素γ、白介素(IL-8、IL-6、IL-12、IL-1)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)和基质金属蛋白酶(MMPs)的产生。痤疮表皮杆菌还诱导角质形成细胞释放IL-1ɑ,促进角质形成细胞增殖和粉刺形成。痤疮丙酸杆菌激活Th17和Th1反应,诱导IL-17和IFN-γ同时分泌。在适应性免疫中,Th17细胞可通过炎症反应和皮脂稳态失衡的协同作用引起及加重痤疮,其主要通过分泌细胞因子IL-17及IL-22发挥重要作用。

痤疮丙酸杆菌诱导斑马鱼炎症反应,中性粒细胞发生免疫应答,向皮肤表皮迁移并聚集。转基因中性粒细胞荧光斑马鱼的中性粒细胞可在荧光显微镜下被明显观察,因此可以通过实时观察斑马鱼皮肤的中性粒细胞数量评价供试品的祛痘功效。

【实验方法】

将斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。正常对照组不做处理,模型对照组和供试品组均加入痤疮丙酸杆菌,从而完成造模处理,供试品组中添加一定浓度的受试化妆品。避光孵育一段时间后,将各组斑马鱼在体视显微镜下拍照并保存图片,用高级图像分析软件对斑马鱼皮肤部位的中性粒细胞进行计数,以中性粒细胞相比于模型对照组的减少量评价受试化妆品祛痘功效。

【评价指标】

皮肤中性粒细胞数量

【结果展示】(展示图片仅供参考,实际实验组别依据合同而定)

斑马鱼皮肤中性粒细胞表型图

图1 斑马鱼皮肤中性粒细胞表型图。黄色虚线区域为计算区域,绿色荧光点为中性粒细胞

【评价结论】

1、经过各组斑马鱼的对比实验,供试品组的斑马鱼中性粒细胞数目与模型对照组相比明显减少。

2、本实验证实了该供试品具有祛痘功效。

【参考文献】

[1] 何陵玲,张 毅,龚秋君,张 青. 痤疮的机理症状及祛痘型护肤品功效类型 [J].日 用 化 学 工 业,2020, 5(50):336-342

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