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斑马鱼实验模型
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利用斑马鱼模型评价眼毒性

【评价原理】

斑马鱼胚胎视力发育迅速,受精后发育4天的幼鱼就已经依赖视觉线索进行捕食和躲避行为。斑马鱼不仅在角膜、晶状体、脉络膜、视网膜以及血管化和神经支配等结构上和人类的眼睛有明显的相似性,而且还有保守的基因表达、细胞构成和组织结构,因此为研究药物眼部毒性提供了一个极好的模型。

我们评价斑马鱼眼毒性有4个指标:1.眼睛大小;2.眼部细胞凋亡;3.眼部血管面积;4.眼部病理切片。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和供试品组,供试品组(药物通过溶解到养鱼用水中或灌胃的方式摄入到斑马鱼体内)。

服用一段时间眼保护剂后,我们在解剖显微镜下观察眼睛大小;整体做凋亡细胞特异性染色,观察眼部细胞凋亡;通过荧光显微镜观察眼部血管面积,同时制作成病理切片观察眼部的病理结构变化。

【结果展示】

斑马鱼眼睛表型图

图1. 斑马鱼眼睛表型图

箭头指示区域为眼

可以看到,药物组眼睛相较于正常对照组明显减小。

斑马鱼眼细胞凋亡表型图

图2. 斑马鱼眼细胞凋亡表型图

黄色虚线区域为眼,绿色小点为凋亡细胞

可以看到,药物组的凋亡细胞较正常对照组明显增多。

斑马鱼眼部血管面积

图3. 斑马鱼眼部血管面积

黄色虚线标记血管面积

可以看到,药物组眼睛血管面积相较于正常对照组明显增加。

眼部凋亡细胞病理切片

图4. 眼部凋亡细胞病理切片

可以看到,药物组出现较多的凋亡细胞,表现为细胞固缩、染色质边集,视网膜结构异于正常对照组。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,药物组斑马鱼眼睛明显变小,凋亡细胞明显增多,眼部血管面积明显增多,在病理切片中出现较多的凋亡细胞,表现为细胞固缩、染色质边集,视网膜结构异常。

2.本实验证实了药物的眼毒性。