环特生物斑马鱼和大小鼠实验中心
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斑马鱼与大小鼠模型实验中心

利用斑马鱼模型评价保护视力功效

【评价原理】

随着电子产品的广泛使用,用眼的时间和强度已远超过去,用眼过度引起一系列视力问题。研究表明,高度近视、视网膜疾病、白内障、眼干燥关节综合征均与眼细胞凋亡相关。斑马鱼的眼部血管结构跟人非常相似,斑马鱼视网膜结构也跟人高度相似。用霉酚酸吗啉乙酯可以诱发斑马鱼眼细胞凋亡,模拟人的眼部疾病。

用特异性荧光染色(呈绿色),患有眼疾的斑马鱼眼细胞凋亡较正常斑马鱼明显增多,在荧光显微镜下可以观察到。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和药物组。其中正常对照组未摄入霉酚酸吗啉乙酯,模型对照组与服用眼保护剂组都摄入了等量的霉酚酸吗啉乙酯(霉酚酸吗啉乙酯通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。眼保护剂组在摄入霉酚酸吗啉乙酯的同时摄入蓝莓叶黄素酯之类的眼保护剂。

服用一段时间眼保护剂后,我们对斑马鱼整体做凋亡细胞特异性染色,观察细胞凋亡,同时制作成病理切片观察眼部的病理结构变化。

【结果展示】

斑马鱼眼细胞凋亡表型图

图1. 斑马鱼眼细胞凋亡表型图

黄色虚线区域为眼,绿色小点为凋亡细胞

可以看到,模型对照组的凋亡细胞较正常对照组明显增多,而眼保护剂组凋亡细胞与正常细胞相似。

眼部凋亡细胞病理切片

图2. 眼部凋亡细胞病理切片

红色箭头指向凋亡细胞

从病理切片中也能看出来,模型对照组出现较多的凋亡细胞,表现为细胞固缩、染色质边集,而眼保护剂组细胞和正常斑马鱼中形态相似。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,眼保护剂组斑马鱼眼细胞与正常对照组相似,并未出现模型对照组的大面积细胞凋亡情况。

2.本实验证实了蓝莓叶黄素酯具有保护视力功效。