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利用斑马鱼模型评价化妆品抗氧化作用

人体皮肤逐渐衰老是活性氧自由基对皮肤的长期氧化作用,具有抗氧化活性的化妆品能够清除皮肤表面自由基,通过斑马鱼技术可以有效评价化妆品及其原料清除自由基的能力。

【评价原理】

甲萘醌能产生活性氧自由基,当自由基产生量大于机体清除能力时就发生氧化应激反应,通过斑马鱼卵黄囊荧光强度评价供试品抗氧化作用。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成若干组,含正常对照组、模型对照组和化妆品组。其中正常对照组未经任何处理,模型对照组和化妆品组都加入等量的甲萘醌(甲萘醌通过溶解到标准稀释水中的方式摄入到斑马鱼体内)。化妆品组在加入甲萘醌的同时加入一定浓度的化妆品。

使用化妆品24 hpf后,,我们对斑马鱼整体进行特异性荧光染色,观察斑马鱼卵黄囊活性氧自由基产生情况。

【结果展示】(展示图片仅供参考,实际实验组别依据合同而定)

斑马鱼卵黄囊荧光表型图

图1. 斑马鱼卵黄囊荧光表型图

黄色为分析区域,绿色荧光代表氧自由基

可以看到,阳性对照组和化妆品组与正常对照组相似,卵黄囊中只有少量的活性氧自由基。

【评价结论】

1.经过各组斑马鱼对比实验,阳性对照组和化妆品组与正常对照组相似,卵黄囊中只有少量的活性氧自由基。

2.本实验证实了该化妆品具有抗氧化的作用。

【参考文献】

[1] Bladen C L , Kozlowski D J , Dynan W S . Effects of Low-Dose Ionizing Radiation and Menadione, an Inducer of Oxidative Stress, Alone and in Combination in a Vertebrate Embryo Model[J]. Radiation Research, 2012, 178(5):499.

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[3]鲁疆, 王占洋, 袁玉婷,等. Developmental Toxicity of Cadmium Chloride to Zebrafish Embryo[J]. 生态毒理学报, 2013, 008(003):381-388.

[4] 李毅敏, 赵树仪. N-乙酰半胱氨酸的研究进展[J]. 天津药学, 2003, 015(002):50-53.

[5]Bradley, Seredick, Barbara. Reactive oxygen probes - a broad range of colors with easier labeling and compatibility with fixation: novel CellROX(R) reagents from Molecular Probes(R) (P3295)[J]. Journal of Immunology.