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斑马鱼实验模型
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利用斑马鱼模型评价中枢神经保护作用

【评价原理】

中枢神经损伤常表现为偏瘫、失语、智力障碍或昏迷,甚至死亡。斑马鱼是一种与人类同源性较高的脊椎动物,大脑具有典型脊椎动物脑部形态学特征,髓鞘结构特征和少突胶质细胞分化过程与哺乳动物高度一致。而且斑马鱼生长发育周期短,神经系统简单,有利于开展中枢神经保护剂的研究。霉酚酸吗啉乙酯可以抑制斑马鱼神经元轴突的生长,干扰神经及细胞的迁移和导致发育畸形,使神经元细胞凋亡。

经过特异性荧光染色(凋亡细胞呈绿色),中枢神经损伤的斑马鱼在脑和脊髓部位会布满凋亡细胞,比正常斑马鱼多很多,可以明显被观察到。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用中枢神经保护剂组。其中正常对照组未经任何处理,模型对照组与服用中枢神经保护剂组都摄入了等量的霉酚酸吗啉乙酯(霉酚酸吗啉乙酯通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用中枢神经保护剂组在摄入霉酚酸吗啉乙酯的同时摄入还原型谷胱甘肽、养血清脑颗粒和安宫牛黄丸之类的中枢神经保护剂。

服用中枢神经保护剂一段时间后,我们对斑马鱼整体进行特异性荧光染色,观察中枢神经细胞的凋亡情况。

【结果展示】

斑马鱼中枢神经保护表型图

图1. 斑马鱼中枢神经保护表型图

黄色虚线区域为中枢神经,绿色光点为凋亡细胞

可以看到,服用中枢神经保护剂组的中枢神经情况与正常对照组比较相似,没有明显的细胞凋亡。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用中枢神经保护剂组的中枢神经情况与正常对照组相似,并未出现模型对照组大量凋亡细胞的情况。

2.本实验证实了还原型谷胱甘肽、养血清脑颗粒和安宫牛黄丸具有明显保护中枢神经作用。